近日，瀘州醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究中心研究人員發(fā)表論文，旨在構(gòu)建微管解離蛋白stathmin過表達(dá)的人SMMC-7721肝癌細(xì)胞株，并探討stathmin過表達(dá)對肝癌細(xì)胞增殖侵襲的影響。研究指出，stathmin的過表達(dá)能促進(jìn)人SMMC-7721肝癌細(xì)胞的增殖侵襲能力。該文發(fā)表在2014年第10期《重慶醫(yī)學(xué)》雜志上。

 

　　采用脂質(zhì)體將Flag-pcDNA3.1-stathmin重組質(zhì)粒和Flag-pcDNA3.1空質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染人SMMC-7221肝癌細(xì)胞，抗生素加壓篩選，構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)stathmin的SMMC-7721細(xì)胞（實驗組），以穩(wěn)轉(zhuǎn)空質(zhì)粒的細(xì)胞為對照組，Western blot對建系細(xì)胞進(jìn)行鑒定。采用CCK-8和軟瓊脂克隆形成實驗檢測細(xì)胞增殖；流式細(xì)胞術(shù)（FCM）檢測細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期；體外細(xì)胞運(yùn)動侵襲實驗（Transwell）測定細(xì)胞的運(yùn)動、侵襲能力。

 

　　實驗組中stathmin的表達(dá)0.76±0.12較對照組0.16±0.05明顯增加（P<0.05），成功構(gòu)建了過表達(dá)stathmin的人SMMC-7721肝癌細(xì)胞株；CCK-8和軟瓊脂克隆形成實驗顯示，實驗組的細(xì)胞增殖較對照組明顯增加（A4500.60±0.05 vs.0.29±0.03，P<0.01）；實驗組細(xì)胞凋亡降低[（5.80±0.33）%vs.（11.57±1.09）%，P<0.05]，細(xì)胞周期阻滯在G2/M期；Transwell實驗結(jié)果證實，與對照組比較，實驗組細(xì)胞運(yùn)動和侵襲能力均顯著加強(qiáng)[運(yùn)動實驗透膜細(xì)胞數(shù)：（54.03±7.21）個vs.（130.45±14.13）個；侵襲實驗透膜細(xì)胞數(shù)：（17.75±2.52）個vs.（57.76±8.50）個]，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。