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更新時(shí)間: | 2017-08-02 |
細(xì)胞成脂誘導(dǎo),1、配置FBS10%含量的HG-DMEM培養(yǎng)液; 2、在配制完成的HG-DMEM培養(yǎng)液中加入1μM地塞米松,10μg/ml胰島素,200μM吲哚美辛和0.5mM IBMX; 3、準(zhǔn)備6孔培養(yǎng)板,將P4細(xì)胞按照2×104個(gè)/平方厘米的規(guī)格接種于原始HG-DMEM培養(yǎng)液中
細(xì)胞成脂誘導(dǎo)
成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)液配備與誘導(dǎo)操作:
1、配置FBS10%含量的HG-DMEM培養(yǎng)液;
2、在配制完成的HG-DMEM培養(yǎng)液中加入1μM地塞米松,10μg/ml胰島素,200μM吲哚美辛和0.5mM IBMX;
3、準(zhǔn)備6孔培養(yǎng)板,將P4細(xì)胞按照2×104個(gè)/平方厘米的規(guī)格接種于原始HG-DMEM培養(yǎng)液中
4、待細(xì)胞長(zhǎng)至基本融合后,更換上述制備完成的成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)液培養(yǎng)2天,在用只含有10μg/ml胰島素的成脂維持培養(yǎng)液培養(yǎng)1天,如此交替循環(huán)培養(yǎng)至14天,使用紅油O染色。
紅油O染色方法介紹:
1、去除細(xì)胞使用的當(dāng)前培養(yǎng)液,使用PBS清洗兩次;
2、27.5%甲醛室溫固定20分鐘;
3、重蒸餾水清洗3此,空氣中干燥;
4、加入0.5%的紅油室溫孵育一小時(shí);
5、配制70%乙醇溶液清洗3次;
6、倒置顯微鏡觀察拍照記錄。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
客戶提供:
細(xì)胞種類(lèi)和誘導(dǎo)分化細(xì)胞類(lèi)型。
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
詳談,我們會(huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。
【本公司合作項(xiàng)目】
慢病毒,腺病毒,RNAi類(lèi),分子生物實(shí)驗(yàn),病理實(shí)驗(yàn),免疫學(xué)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞實(shí)驗(yàn),動(dòng)物實(shí)驗(yàn),蛋白組學(xué)實(shí)驗(yàn)等,能夠進(jìn)行藥效學(xué)評(píng)價(jià)、毒理學(xué)評(píng)價(jià)、細(xì)胞藥篩、動(dòng)物建模、病理檢測(cè)、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量測(cè)序、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析服務(wù)!
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細(xì)胞成脂誘導(dǎo) ?