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實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^(guò)TRAP-PCR銀染法檢測(cè)鑒定樣品中端粒酶活性
實(shí)驗(yàn)原理:端粒DNA與細(xì)胞的壽命密切相關(guān),而合成又依賴于端粒酶。正常人體細(xì)胞中不能檢測(cè)出端粒酶活性的表達(dá),而腫瘤細(xì)胞株及大多數(shù)腫瘤組織中的端粒酶活性卻異常的高表達(dá)。TRAP-銀染法端粒酶活性檢測(cè)試劑盒是采用端粒重復(fù)序列擴(kuò)增的方法,利用銀染技術(shù)檢測(cè)端粒酶的活性。陽(yáng)性結(jié)果在凝膠電泳上顯示相隔6 bp的梯狀條帶,
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細(xì)胞Hoechst凋亡染色/細(xì)胞凋亡檢測(cè)
Hoechst染料都可在350nm左右的紫外光激發(fā)。都在461nm處發(fā)出藍(lán)靛色熒光光。Hoechst染色時(shí)無(wú)需用DAB來(lái)顯色,它直接結(jié)合細(xì)胞的DNA ,經(jīng)過(guò)紫外光激發(fā)后發(fā)出藍(lán)色熒光。
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Tunel檢測(cè)/凋亡檢測(cè)
TUNLE即原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)。凋亡細(xì)胞的DNA雙鏈斷裂或一條鏈出現(xiàn)缺口,產(chǎn)生一系列3′-OH末端,在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)作用下,將脫氧核糖核苷酸和生物素所形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3′末端,從而進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測(cè)。